ブックタイトル日本結晶学会誌Vol61No1

概要

日本結晶学会誌Vol61No1

安永卓生図1単粒子解析法の概要．（Overview of single particle analysis.）（上段）タンパク質やその複合体の同一粒子を入った液を，孔（0.5～2μm程度）のあいた炭素膜に乗せ，その後，濾紙などで余分な液を吸い取り，液の薄膜を孔に張った状態で，液体エタンやプロパンなどに急速に浸し，10 5 K/sec以上の速度で凍結する．これにより，水は結晶を作ることなく，液体の状態に近いガラス状で凍結される．その際，薄膜内では，粒子がさまざまな向きを向いた状態で固定される．（中段）さまざまな向きを向いた粒子を計算機上で集め，三次元像に再構成する．（下段）実際のクライオ電子顕微鏡像の例（左）と三次元像（右）を示している．（左）黒がタンパク質であり，βガラクトシダーゼの例で，RELIONソフトウェアのチュートリアルデータより著者が加工したものである．抽出した粒子は，白い○で囲われている．（右）PDB（6CVM）で公開された1.8 Aの密度マップをchimera 17）を使って可視化した．編集部注：カラーの図は電子版を参照下さい．図2電子線トモグラフィー法により観察された細胞．（Cell architecture observed by cryo-electron tomography.）（上段）細胞などを電子顕微鏡撮影用のグリッド（カーボン膜などが張られた金属）上に培養する．（中段）観察したい視野を電子顕微鏡内で傾斜させながら撮影し，三次元像に再構成する．（下段）実際に撮影された細胞の一部（糸状仮足：細胞から伸長した細胞運動に必要な構造）の連続傾斜画像の一部を示したもの．異なる角度からの視野であるため，その観察像が異なり，内部に繊維束（アクチンというタンパク質からなる）が観察できる向き（中，右図）とできない向き（左図）が存在している．44日本結晶学会誌第61巻第1号（2019）